抗CPV-2a单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王净

作者： 王净;李刚;王鹏;曾妮;穆秀明;高志花;王慧文;史利军

作者机构：

关键词： 犬细小病毒;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2011 年 30 卷 03 期

页码： 357-363

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 犬细小病毒病是危害养犬业的重要传染病之一,患病犬难以治愈。单克隆抗体治疗此病效果明显,本文介绍了制备抗CPV-2a单克隆抗体的方法。用纯化的犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)2a型分离株免疫新西兰大白兔和Balb/c小鼠制备抗CPV-2a多克隆抗体及单克隆抗体。经亚克隆得到1H9、2B5、2B7和2C7共4株单抗,Western blotting鉴定单抗的免疫反应性;间接ELISA方法检测单抗的特异性。为了快速对犬细小病毒病作出诊断,建立了CPV-2a双抗夹心ELISA方法。兔多抗作为捕获抗体,鼠单抗作为示踪抗体,辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG作为检测系统;捕获抗体和示踪抗体最佳稀释度分别为1:800和1:2000;检测系统最佳稀释度为1:4000。结果表明:所得4株单抗与pET-32a-VP2蛋白发生特异性反应,且与狂犬病毒(RV)、犬温热病毒(CDV)不交叉反应;建立的双抗夹心ELISA方法对病毒的最低检出量为4.375μg/mL,与美国RB试剂盒相比,符合率为95%。单抗制备为犬细小病毒病的治疗奠定了基础;双抗夹心ELISA方法的建立为疑似粪便样本提供了简单、快速和可靠的检测手段。

分类号： S858.292

  • 相关文献

[1]Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立. 梁伟峰,周国辉,刘文铭,李超斯,刘云,于力. 2016

[2]马流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 姬媛媛,郭巍,王晓钧,王征,卢刚,赵立平,李红梅,相文华. 2011

[3]单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立. 张海洋,刘爽,戚雪芹,王权,陈兆国,韩先干,蒋蔚. 2021

[4]马动脉炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 胡月,戚亭,赵世华,关平原,王晓钧. 2014

[5]阪崎克罗诺杆菌双抗夹心酶联免疫吸附检测方法的建立. 张欣,王福成,韩先干,祁克宗,宋祥军,董雨豪,蒋蔚. 2024

[6]禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立. 负炳岭,刘文,李德龙,秦立廷,刘在斯,吴关,祁小乐,王永强,高宏雷,高玉龙,王笑梅. 2012

[7]禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 贠炳岭,刘文,李德龙,秦立廷,刘在斯,吴关,祁小乐,王永强,高宏雷,王笑梅,高玉龙. 2012

[8]鸡高迁移率蛋白1双抗体夹心ELISA方法的建立. 曲昱蓉,詹媛,仇旭升,丁铲. 2018

[9]抗犬细小病毒单克隆抗体的制备与鉴定. 杨凯越,宋彩玲,李彤彤,王文静,陈慧宇,赵爽爽,刘明. 2020

[10]检测牛IFN-γ双抗体夹心ELISA的建立及在牛结核病诊断上的初步应用. 张改梅,贾红,侯绍华,鑫婷,郭晓宇,袁维峰,刘淑清,吴竞,高新桃. 2014

[11]检测犬免疫球蛋白G的夹心ELISA方法的建立. 王正阳,刘平黄,梁琳,陈建飞,吕世明,崔尚金. 2016

[12]犬粪便中细粒棘球绦虫抗原双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用. 刘原源,黄书晨,高珺珊,王晓岑,宫鹏涛,张壮志,李建华,杨举,李赫. 2017

[13]检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法建立及初步应用. 谢星星,李银,李祥瑞,赵冬敏,黄欣梅,韩凯凯,刘玉卓. 2014

[14]鉴别检测兔出血症病毒1型、2型双抗体夹心ELISA方法的建立及应用. 陈兴继,魏后军,范志宇,胡波,宋艳华,陈萌萌,仇汝龙,葛雷,王芳. 2023

[15]猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 张清真,陶洁,殷秀辰,熊年年,李星,刘惠莉. 2017

[16]双抗体夹心ELISA法测定猪α-干扰素的浓度. 蒋佳颖,王一成,杨孝朴,袁秀芳,李军星,徐丽华. 2015

[17]猪圆环病毒2型亲和肽双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证. 郝俊芳,黄凯,崔艳艳,王冠,马冰冰,王方雨. 2023

[18]鸡减蛋综合征病毒中和性单克隆抗体的制备、鉴定及在双抗体夹心ELISA中的应用. 魏蔷,李青梅,金前跃,宋亚鹏,白怡霖,张改平. 2024

[19]用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原. 古努尔·吐尔逊,米晓云,张壮志,石保新,吐尔洪·依米提,张旭,巫剑,赵莉,阿曼古丽·马木提,金映红,张文宝. 2011

[20]检测牛IFN-γ 双抗体夹心 ELISA 的建立及在牛结核病诊断上的初步应用. 张改梅,贾红,侯绍华,鑫婷,郭晓宇,袁维峰,刘淑清,吴竞,高新桃,李明,董瑞凯,朱鸿飞. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序