转基因在菊花叶肉原生质体瞬时表达及亚细胞定位分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 丁林云
作者: 丁林云;万可;杨丹;王同;王春梅;郭书巧;杨霞
作者机构:
关键词: 菊花;原生质体;瞬时表达;亚细胞定位
期刊名称: 江苏农业学报
ISSN: 1000-4440
年卷期: 2023 年 002 期
页码: 518-524
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为探究用于亚细胞定位研究的菊花叶肉原生质体分离的最适条件,本研究以菊花无菌苗叶片为受体材料,分析不同叶龄叶片和酶解时间对菊花原生质体细胞产量的影响,并利用外源质粒的导入验证了聚乙二醇(PEG)介导的菊花原生质体瞬时转化体系。结果表明,以组织培养14 d的菊花无菌苗叶片为外植体材料,在含1.5%纤维素酶、0.4%离析酶和0.8 mol/L甘露醇的酶解液中振荡酶解6 h,能获得高产的原生质体细胞。采用PEG介导的瞬时转化含绿色荧光蛋白(GFP)的表达载体,在菊花原生质体细胞中观察到强烈的绿色荧光信号。结果显示,稗草乙烯转录因子基因(EcERF)在菊花原生质体中与本氏烟草叶片中的瞬时表达一致,EcERF基因定位于细胞核中。
分类号: S682.11
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