柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姜明慧

作者： 姜明慧;宋勇乐;苏观志;陈庆彪;李娟;戚南山;廖申权;吕敏娜;林栩慧;蔡海明;张旭;孙铭飞

作者机构：

关键词： 柔嫩艾美耳球虫;GAM56;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2025 年 50 卷 003 期

页码： 1-7

摘要： 为研究柔嫩艾美耳球虫GAM56蛋白的生物学功能，以柔嫩艾美耳球虫广东株配子体cDNA为模板，克隆该分离虫株的gam56基因编码序列。构建pET-B2M-GAM56截短表达载体，利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达GAM56蛋白，纯化后免疫BALB/c小鼠制备GAM56多克隆抗体。通过间接ELISA和Western blot分析抗体的效价和特异性；收集E. tenella(GD)配子体阶段样品，利用GAM56多克隆抗体进行免疫荧光检测以评价其应用效果。结果显示：相比E. tenella(Houghton)参考虫株，E. tenella(GD)的gam56基因存在末端部分片段的缺失，CDS序列1 077 bp，可编码358个氨基酸；预测蛋白大小41.3 kDa。GAM56保守区域截短原核表达蛋白主要以包涵体形式存在。间接免疫荧光分析显示该抗体能够特异性识别配子体阶段的GAM56蛋白。该研究为进一步解析柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56生物学功能提供了材料，为艾美耳球虫有性发育相关蛋白的功能研究与机制解析奠定基础。

分类号： S852.72

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