Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因条件敲低小鼠的基因型鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 司道祝

作者： 司道祝;彭单伊;张荣;夏耘秋;牛超

作者机构：

关键词： Brg1;Ⅱ型肺泡上皮细胞;基因敲低;基因型

期刊名称： 中国细胞生物学学报

ISSN： 1674-7666

年卷期： 2017 年 03 期

页码： 280-287

收录情况： CSCD

摘要： 该文旨在鉴定特异敲低Ⅱ型肺泡上皮细胞中Brg1(Brahma-related gene 1)基因小鼠的基因型,为进一步研究Brg1在肺相关疾病中的作用奠定基础。将两对转基因小鼠Brg1fl/fl和SP-C-rt TA/(tet O)7-Cre进行繁殖交配,将得到纯合子、杂合子及野生型3种基因型。出生后1周龄剪尾提取基因组DNA,PCR法判定基因型。用多西环素诱导法诱导(tet O)7-Cre重组酶活性,靶向剪切Ⅱ型肺泡上皮细胞上Brg1基因,磁珠分选法提取小鼠原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,通过观察细胞生长特征、检测pro SP-C表达鉴定原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,RT-PCR法、Western blot检测Brg1表达水平。结果显示,成功繁殖了Brg1纯合子小鼠,通过磁珠分选法成功分离了原代Ⅱ型肺泡上皮细胞,用多西环素诱导法成功敲低了Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因。该结果为相关研究提供动物模型奠定了基础。

分类号： R563

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