CP4-EPSPS蛋白的模拟胃肠液消化稳定性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵浩含

作者： 赵浩含;王建华;刘允军

作者机构：

关键词： CP4-EPSPS蛋白;消化稳定性;草甘膦;模拟胃液;模拟肠液

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2017 年 02 期

页码： 180-185+204

收录情况： 北大核心

摘要： CP4-EPSPS蛋白与草甘膦亲和力低,使草甘膦不能阻断生物体内的莽草酸合成途径,成功用于培育抗草甘膦转基因作物。[目的]为评价CP4-EPSPS蛋白的食用安全性,分析了CP4-EPSPS蛋白在模拟胃肠液消化中的稳定性研究。[方法]根据NCBI公布的基因序列信息,人工合成CP4-EPSPS基因并构建原核表达载体p ET-CP4,转化大肠杆菌菌株Transetta(DE3)并表达CP4-EPSPS蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化蛋白。根据国家标准建立体外模拟胃肠液消化体系,对照和样品蛋白均以5 g/L的浓度进行模拟胃液消化,以2 g/L的浓度进行模拟肠液消化。在消化0 s、15 s、2 min、30 min和60 min后分别进行取样,然后将其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳,并进行Western Blot杂交分析。[结果]模拟胃肠液消化实验结果表明,CP4-EPSPS蛋白在模拟胃肠液中均在15 s内即被消化,SDS-PAGE与Western Blot杂交未检测到蛋白残留。[结论]说明CP4-EPSPS蛋白在胃肠液体系中极易被消化。

分类号： S481.1

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