禽流感RT-PCR诊断法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔尚金

作者： 崔尚金;陈化兰;唐秀英;邓国华;田国斌;于康震

作者机构：

关键词： 禽感染,RT-PCR,诊断

期刊名称： 中国畜禽传染病

ISSN： 1008-0589

年卷期： 1998 年 02 期

页码：

收录情况： 北大核心

摘要： 根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物，并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ，建立了逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法。应用此法对鸡胚培养的ＡＩＶ尿囊液、ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测，并与琼脂扩散试验和电镜技术作了对比。特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）、传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）、传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、减蛋综合征病毒（ＥＤＳ－７６Ｖ）等的感染鸡胚尿囊液作为对照。结果表明，ＡＩＶ尿囊液ＲＴ－ＰＣＲ全部阳性，ＳＰＦ感染鸡粪便８７份，ＲＴ－ＰＣＲ检出６９份阳性，样品处理浓缩后琼脂扩散检出１１份，电镜检测了２３份样品，仅检出２份阳性。非特异性对照样品经ＲＴ－ＰＣＲ检测全部阴性。将ＡＩＶ感染鸡胚尿囊液作１０倍系列连续稀释，可检出稀释度为１０－２的病毒尿囊液。ＲＴ－ＰＣＲ最早检出时间为感染后第３天，而琼扩和电镜均是７天。该法具有高度的特异性和灵敏性，且节约时间（只需８小时左右），可从分子水平上对ＡＩＶ进行早期快速诊断和流行病学调查

分类号： S858.3

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