以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭东伟

作者： 郭东伟;佘茂云;李连城;陈耀峰;陈明;徐兆师;马有志

作者机构：

关键词： 高分子量DNA;蔗糖密度梯度离心;细胞周期同步化;染色体流式分选;BAC

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2006 年 32 卷 12 期

页码： 1920-1923

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了克服以叶片为材提取HMW DNA的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法。该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体,经去蛋白、酶切、透析,获得HMW DNA。经检测,来自200条根尖(10个胶块)的HMW DNA的浓度约为4～20ng/μL,而连接、转化后的BAC克隆平均插入片段超过100kb。证明该法适用于提取HMW DNA以构建BAC文库。

分类号： S512.1

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