蓝舌病病毒重组VP7蛋白单克隆抗体制备及竞争ELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 耿宏伟

作者: 耿宏伟;秦永丽;李俊平;杨涛;孙恩成;刘霓红;白安斌;徐青元;王凌凤;赵晶;覃绍敏;林俊;郭怡璠;吴东来

作者机构:

关键词: 蓝舌病病毒;重组VP7蛋白;群特异性单克隆抗体;竞争ELISA

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2012 年 34 卷 05 期

页码: 388-392

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了建立蓝舌病(BT)的血清学诊断方法,本研究利用原核表达的蓝舌病病毒(BTV)血清型12型VP7纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备2株单克隆抗体(MAb),分别命名为BTV-2D10和BTV-4H7。IFA试验表明,2株MAb均能与BTV 24个血清型发生特异性反应,而与茨城病病毒(IBAV)、中山病病毒(CV)、赤羽病病毒(AKAV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛轮状病毒(BRV)、牛肠道病毒(BEV)、牛呼肠孤病毒(RV)及口蹄疫病毒(FMDV)无交叉反应,表明2株MAb均为BTV群特异性抗体。采用重组表达的VP7蛋白作为包被抗原建立的竞争ELISA方法证明,BTV-4H7 MAb对不同血清型BTV阳性血清具有良好的阻断效果,而对AKAV、IBAV、BRV和FMDV阳性血清无阻断作用。本研究建立的竞争ELISA方法与IDEXX公司的试剂盒检测包括65份已知背景血清和322份采自广西省的山羊血清样品,检测结果符合率分别达100%和98%。该竞争ELISA方法的建立为BTV抗体的监测提供了安全、快速、准确的技术手段。

分类号: S855.3

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