A型塞内卡病毒的分离与鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 郑敏
作者: 郑敏;杨帆;曹伟军;张伟;唐丽杰;郑海学
作者机构: 东北农业大学动物医学学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室
关键词: A型塞内卡病毒;分离鉴定;遗传进化分析
期刊名称: 中国兽医科学
年卷期: 2022 年 010 期
页码: 1281-1287
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了确定2020年河南某猪场水疱性疾病的病因,通过提取发病猪的水疱皮样品的RNA,用RT-PCR方法初步检测,经BHK-21细胞分离培养病毒,进一步用间接免疫荧光试验(IFA)鉴定;利用蚀斑形成试验及病毒一步生长曲线,分析病毒分离株的增殖特性;RT-PCR方法扩增全基因组序列,进而构建基于P1基因的系统进化树。RT-PCR鉴定结果表明,猪场水疱性疾病的样品中只有A型塞内卡病毒(SVA)核酸呈阳性;细胞分离和IFA鉴定结果表明,成功分离到的1株病原为SVA,并命名为SVA/HN/2020,该分离株能够与SVA免疫家兔多抗发生特异性反应;蚀斑试验和病毒一步生长曲线结果表明,该毒株能够在BHK-21细胞层上形成蚀斑,并在感染后的第16小时病毒滴度达到最高为1×109.5TCID50/100μL;全基因组测序结果表明,该毒株基因组全长7 279 bp(不含Poly A),开放阅读框为6 546 bp,可编码含2 181个氨基酸残基的多聚蛋白;其中P1基因大小为2 574 bp,其核苷酸序列分析显示,该分离株与在我国分离的SVAHB/CH/2016和SVA CH/01/2015的同源性最高,为99.6%~99.7%,而与2018-2020年间从广东、广西、河南、河北等地的分离毒株的同源性为95.6%~97.0%。结论:本研究成功分离到1株SVA分离株,为进一步研究SVA致病机制及防控技术研发奠定了基础。
分类号: S852.65
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