β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因在大肠杆菌中共表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高海有

作者： 高海有;刘正初;段盛文;成莉凤;石岩;冯湘沅;郑霞;郑科;宋志姣

作者机构：

关键词： β-甘露聚糖酶;木聚糖酶;大肠杆菌;共表达

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2012 年 39 卷 03 期

页码： 344-352

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】β-甘露聚糖酶和木聚糖酶都属于半纤维素酶,它们已经同时运用于工农业生产的许多领域。构建β-甘露聚糖酶和木聚糖酶共表达菌株并进行相关评价。【方法】通过设计一个共同的酶切位点,将菌株Bacillus subtilis BE-91中的β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因串联到表达载体pET28a(+)上,转化大肠杆菌构建了一株能够共表达β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的菌株B.pET28a-man-xyl。【结果】菌株诱导21 h后,发酵液中β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的酶活分别为713.34 U/mL和1455.83 U/mL,是胞内酶活的11.8倍和2.53倍。【结论】SDS-PAGE分析、水解圈活性检测和胞外酶与胞内酶酶活检测表明:两个酶均以功能蛋白独立分泌到胞外。此外,与β-甘露聚糖酶和木聚糖酶单独酶解半纤维素相比,复合酶的酶解效果更好。菌株的成功构建为复合酶制剂(半纤维素酶制剂)的研究和生产奠定基础。

分类号： Q78

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