紫花苜蓿LEA蛋白基因ihpRNA表达载体构建及烟草转化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 白永琴

作者: 白永琴;康俊梅;孙彦;杨青川;李燕

作者机构:

关键词: 紫花苜蓿;MsLEA3-1基因;RNA干扰;ihpRNA表达载体;烟草转化

期刊名称: 作物学报

ISSN: 0496-3490

年卷期: 2010 年 36 卷 09 期

页码: 1484-1489

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据紫花苜蓿LEA蛋白MsLEA3-1基因(GenBank登录号为EU665182)序列,设计两对含有酶切位点的特异性引物LEAf1/LEAf2和LEAr1/LEAr2,以构建好的PMD-LEA质粒为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段pMD-F和pMD-R,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建成含有发夹结构的RNAi载体pART-F-R,经过NotI酶切鉴定,证明载体构建成功。通过农杆菌介导的方法,以干扰表达载体pART-F-R转化烟草,经过PCR检测,得到16株阳性转基因植株,为MsLEA3-1基因的功能研究奠定基础。

分类号: S572

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