嗜热子囊菌光孢变种内切葡聚糖酶I基因在毕赤酵母中的表达及部分酶学性质

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张亚波

作者： 张亚波;刘连盟;徐荣燕;李多川

作者机构：

关键词： 纤维素酶;内切葡聚糖酶;嗜热子囊菌光孢变种;嗜热真菌;毕赤酵母

期刊名称： 应用与环境生物学报

ISSN： 1006-687X

年卷期： 2009 年 15 卷 03 期

页码： 419-422

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 嗜热子囊菌是一种嗜热真菌,可以产生具有很高工业价值的内切葡聚糖酶.本研究成功表达了嗜热子囊菌内切葡聚糖酶Ⅰ基因,并获得热稳定的重组内切葡聚糖酶.提取嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)总RNA,通过RT-PCR方法克隆出内切-β-葡聚糖酶eg1基因的成熟肽编码序列.采用基因重组的方法构建该基因的巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris分泌型表达载体pPIC9K-eg1,经线性化后采用电穿孔法将其导入毕赤酵母GS115中,大量筛选后获得高效表达内切葡聚糖酶Ⅰ的毕赤酵母工程菌株GpN24.该菌株采用甲醇诱导120h后,内切葡聚糖酶Ⅰ的活力可达570.7U/mL,最适温度为55℃,在90℃的条件下保温30min后仍具有60%的酶活力;最适pH为5.0,在pH3.0～5.0的条件下酶活力保持稳定.图6表2参16

分类号： Q78

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