基于FMDVIRES的双顺反子载体的构建及体外表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郑海学

作者： 郑海学;郭慧琛;靳野;刘湘涛;谢庆阁

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;IRES;双顺反子;双顺反子载体

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN：

年卷期： 2007 年 08 期

页码： 29-33

收录情况： CSCD

摘要： 利用RT-PCR扩增出口蹄疫病毒小核糖体进入位点(IRES)序列,并定向克隆进pcDNA3.1(+)载体,构建成双顺反子真核表达载体。为了验证该载体是否能够转录出双顺反子mRNA,在IRES起始密码(ATG)下游正确插入增强型的绿色荧光蛋白基因(egfp),把重组质粒转染BHK-21细胞,培养20～48h,在紫外显微镜下观察,能够看到典型的绿色荧光,表明载体能够体能够利用FMDV的IRES能够介导非帽依赖性表达外源基因。并通过流式细胞仪,与同样是CMV启动转录egfp的pGFPN1质粒在细胞中的表达水平进行了比较。该载体的成功构建为体外表达双基因、双顺反子逆转录载体构建以及相关应用奠定基础,并...

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