T细胞IFN-γ表达水平检测方法的建立及其在马传染性贫血疫苗免疫机理研究中的应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 林跃智

作者: 林跃智;邓喜林;沈楠;赵立平;孟庆来;马建;王君伟;邵一鸣;周建华

作者机构:

关键词: IFN-γ;马传染性贫血病毒;流式细胞法

期刊名称: 微生物学报

ISSN: 0001-6209

年卷期: 2008 年 48 卷 6 期

页码: 800-805

收录情况: CSCD

摘要: 【目的】马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱机制和免疫保护机理的研究可以为慢病毒疫苗的研究提供重要的模型。为探讨IFN-γ表达水平与疫苗保护性免疫的关系,本研究旨在建立一种准确、有效地检测EIAV感染马不同T细胞亚型表达IFN-γ水平的方法。【方法】我们将分离的马传贫弱毒疫苗免疫马(FDDV)、强毒感染马(LV)和健康马的外周血单核细胞(PBMC),体外分别经病毒(FDDV)和PMA/Inomycin激活、BFA阻断蛋白分泌、荧光标记马的特异性表面抗体和IFN-γ抗体等过程后,进行流式检测。【结果】疫苗免疫马产生的特异性IFN-γ水平为CD4~+1.7±0.9%/CD8~+6.1±1.2%,而强毒组则为CD4~+0.6±0.1%/CD8~+2.4±0.9%。【结论】本研究建立的多荧光参数流式细胞术同时检测细胞内IFN-γ染色和淋巴细胞亚型的方法,具有良好的特异性,稳定性和重复性。为研究EIAV弱毒疫苗免疫保护机制奠定了基础。

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