马铃薯块茎低温反应抑制差减文库的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈霞

作者： 陈霞;宋波涛;杨建文;谢从华;柳俊

作者机构：

关键词： 马铃薯;差减杂交库;低温

期刊名称： 中国农业科技导报

ISSN： 1008-0864

年卷期： 2010 年 12 卷 06 期

页码： 74-80

摘要： 以4℃(Tester)和20℃(Driver)处理的马铃薯野生种Solanum berthaultii的无性系CW2-1块茎为材料,构建马铃薯块茎低温反应抑制差减文库以进一步筛选差异表达基因。通过PCR鉴定后,获得了含有2112个阳性克隆的差减杂交文库。采用反向Northern方法对差减文库进行筛选鉴定,得到274个含有显著表达差异基因(P/N>3)的阳性克隆。从中挑选了53个克隆进行测序和同源比对分析,合并后获得29个代表不同基因的非重复序列片段,表明文库具有较高质量。随机选取其中4个EST进行基因表达分析,结果显示,在耐低温糖化的S.berthaultii块茎中,4℃下贮藏的块茎基因表达强度高于20℃贮藏的块茎;同在4℃贮藏条件下,S.berthaultii和易低温糖化栽培种E1的块茎中基因的表达量亦存在差异,证明所构建的差减文库富集了马铃薯块茎对低温响应的基因。

分类号： S532

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