羊肠道病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马雪青

作者： 马雪青;张雨星;李平花;王松泰;魏达礼;赵志荀;朵红;卢曾军;孙普

作者机构：

关键词： 羊肠道病毒;TaqMan实时荧光定量RT-PCR;诊断

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 006 期

页码： 757-763

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种灵敏、特异、准确的羊肠道病毒（CEV）实时荧光定量RT-PCR检测方法，本研究基于CEV基因序列的保守区设计特异性引物和探针，并制备标准品，通过优化反应体系和反应条件，建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法，同时对其敏感性、特异性和重复性进行评估，并与常规RT-PCR比较检测临床样品。结果显示，所建方法的标准曲线R2为0.995，拷贝数与Ct值有良好的线性关系；该方法特异性强，与口蹄疫病毒（FMDV）、小反刍兽疫病毒（PPRV）、羊痘病毒（SPV）、羊口疮病毒（ORFV）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）无交叉反应；敏感性最低检测限为23 copies/μL；组内与组间变异系数均小于2.5%，重复性好。使用本方法检测了598份羊的临床样品，阳性检出率（83/598）高于常规RT-PCR (30/598)。上述结果表明，本研究建立了一种灵敏、特异的CEV TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法，并建议采用羊的粪便或肛拭子即可进行CEV的流调工作，这为CEV的诊断、流行病学调查提供了重要的技术支持。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]2016～2017年中国沿海省市虾类偷死野田村病毒(CMNV)分子流行病学调查. 李小平,万晓媛,张庆利,黄倢,董宣,王秀华,邱亮,宋增磊,程东远. 2019

[2]江苏省羊肠道病毒感染的流行病学调查. 蔡旭航,李文良,李基棕,李思远,毛立,许信刚,李彬. 2024

[3]一株羊肠道病毒的分离鉴定及其基因组特征分析. 张雨星,马雪青,李平花,魏达礼,李冬,张婧,王卉,袁红,王萌,白兴文,刘在新,卢曾军,曾巧英,王桂荣,孙普. 2024

[4]新疆北疆区域羊肠道病毒分子流行病学调查及遗传进化分析. 何艺,张明,李霞,蔡旭航,毛立,李彬. 2025

[5]猪流行性腹泻的诊断技术及预防策略. 照日格图,王振普,李志国. 2013

[6]猪圆环病毒病诊断与综合防控技术. 陈秋勇,王隆柏,车勇良,陈如敬,吴学敏,王晨燕,刘玉涛,周伦江. 2017

[7]农田远程智能诊断与决策系统研究与实现. 刘锋,何火娇,吴华瑞. 2007

[8]羔羊产气荚膜梭菌感染的诊断. 王璇,文正常,徐景峨,史开志,冉雪琴. 2013

[9]仔猪轮状病毒感染与鉴别诊断. 肖芳萍,张晓辉,周升富. 2013

[10]蔬菜用药"准、巧、狠". 郭景芬. 2000

[11]猪肠道主要寄生虫的诊断及综合. 姜玲玲,史开志,周思旋,尚以顺. 2014

[12]A、J亚群禽白血病病毒感染肉用种鸡的诊断. 李先桥,史开志,罗明星,吴松成,汪德生. 2009

[13]副猪嗜血杆菌病的诊断与防治措施. 杨茂生,吴位珩,杨莉,徐景峨. 2011

[14]猪传染性胸膜肺炎的诊断和治疗. 单勤婧,马红荣,余牧航. 2016

[15]幼雏发生禽脑脊髓炎的诊断报告. 李峰,秦卓明. 1997

[16]鹧鸪盲肠杆炎的诊治. 黄中利. 1997

[17]猪附红细胞体病快速诊断与治疗. 徐健,周思旋,徐洪忠,余波. 2017

[18]应用人工智能技术进行作物状态诊断初探. 陈立平. 2000

[19]贵州人畜共患弓形虫病的流行趋势与防控措施. 肖芳萍,徐洪忠,余波,杨茂生,任荣清,史开志. 2013

[20]黄瓜病虫害诊断专家系统知识组织的研究与设计. 牛贞福,杨信廷,寿森炎,吴华瑞,杨宝祝. 2004

作者其他论文 更多>>

微信小程序