维氏气单胞菌几丁质酶ChiC的性质和与几丁质结合蛋白协同作用的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 霍凤敏

作者： 霍凤敏;杨雅麟;徐俐;张美超;何夙旭;周志刚

作者机构：

关键词： 几丁质酶;几丁质结合蛋白;酶学性质;协同效应

期刊名称： 中国农业科技导报

ISSN： 1008-0864

年卷期： 2014 年 16 卷 04 期

页码： 175-183

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了探索维氏气单胞菌B565低酶活几丁质酶ChiC的性质及突破其低酶活的应用瓶颈,构建了重组ChiC毕赤酵母工程菌GS115/PIC9-ChiC,进行甲醇诱导表达纯化,研究其基本酶学性质。结果表明,ChiC在毕赤酵母中分泌表达,甲醇诱导48 h后,达到摇瓶水平最大表达量232.6 mg/L。ChiC最适反应pH为8.0,温度为40℃。最适反应条件时比活力为7.6 U/mg。ChiC具有较宽的pH及温度适应性,在pH 3.0~10.0,40℃或者0~40℃,pH 7.0,均可以保持80%以上最适酶活力。同时几丁质结合蛋白CBP21于大肠杆菌中实现胞内可溶表达,其表现出对虾壳几丁质和胶体几丁质的具有不同的结合能力。但CBP21促进ChiC降解胶体几丁质的能力(提高约9倍)明显高于其促进ChiC降解虾壳几丁质的能力(提高约2倍)。上述结果为该几丁质酶基因的深入研究奠定了理论基础,为突破该低酶活几丁质酶的应用瓶颈提供了一种可能的解决方案。

分类号： Q55

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