獭兔RAPD反应体系优化研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 任克良

作者： 任克良;李燕平;贺东昌;吴信生;翟平;梁全忠;张李俊;周胜花

作者机构：

关键词： 獭兔;RAPD;优化

期刊名称： 山西农业科学

ISSN： 1002-2481

年卷期： 2007 年 35 卷 06 期

页码： 103-105

收录情况： CSCD

摘要： 对獭兔RAPD体系中Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、基因组DNA浓度进行研究。结果表明:Taq酶浓度为1.0 U,引物浓度为10 pmol/μl,基因组DNA浓度为50 ng/μl时,可获得清晰、稳定性好的条带。优化的RAPD反应体系为:总体积为20.0μl。10×Buffer(含Mg2+)为2.0μl;dNTPs(各2.5 mmol/L)为2.0μl;Taq酶浓度为1.0 U,引物浓度为10 pmol/μl,基因组DNA浓度为50 ng/μl;超纯水为13.8μl。PCR扩增条件为:97℃预变性7 m in,94℃1 m in,36℃退火1 m in,72℃2 m in,45个循环后,在72℃延伸10 m in结束,4℃保存。PCR扩增产物通过1.4%的琼脂糖凝胶电泳检测。点样后,以2~3 V/cm电压降稳压电泳3.0~3.5 h。

分类号： S829.1

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