检测创伤弧菌两种毒力基因的环介导等温扩增检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 别闯南

作者： 别闯南;王权;白雪瑞;凌娇;李恭贺;蒋蔚

作者机构：

关键词： 环介导等温扩增;溶血素A基因;多重毒素;创伤弧菌

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 48-54

收录情况： 北大核心

摘要： 为建立快速检测致病性创伤弧菌两种毒素的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,分别以创伤弧菌溶血素A基因(hemolysin gene A,HA)和多重毒素(repeats in toxin,RTX)毒力基因的保守序列作为靶序列设计内、外引物。通过肉眼观察白色沉淀初步判断检测结果,通过琼脂糖电泳最终确定检测结果。LAMP检测创伤弧菌的两种基因的灵敏度都达到10 CFU/mL。特异性结果表明致病性创伤弧菌的结果为阳性,而其他几种常见弧菌和食源菌检测结果为阴性。在人工模拟样品检测中,LAMP结果显示,采用水煮法提取DNA,从样品处理到报告结果耗时1.5 h,鱼肉中创伤弧菌的检出限为1×10~2 CFU/g(RTX)和1×10~4 CFU/g(HA);采用同样方法提取DNA进行普通PCR,其检出限为1×10~3 CFU/g(RTX)和1×10~4 CFU/g(HA),耗时4 h。结果表明,本研究建立的LAMP方法检测创伤弧菌两种毒力基因时具有灵敏度高、特异性强、方法简便等优点,适用于食品和养殖业中的现场快速检测。

分类号： TS207.4

  • 相关文献

[1]基于智舌的水产品中创伤弧菌快速检测体系的构建. 陈春艳,窦文超,田师一,陈洁,赵广英. 2012

[2]水产品中创伤弧菌的分离、鉴定及毒性研究. 陈迪,葛彩云,孙玲莉,陆海霞,励建荣,陆维克. 2016

[3]从珍珠龙趸体内分离的1株创伤弧菌的鉴定及耐药性分析. 辜良斌,徐力文,王雨,苏友禄,刘广锋,郭志勋,冯娟. 2016

[4]创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体的制备及其特性分析. 古小莉,李永贤,李惠青,陈洁文,李刘冬. 2017

[5]饲料中添加裂殖壶菌对斑马鱼抗创伤弧菌感染的影响. 陈华,张丽娟,李素一,柯翎,陈叙,林晨韬. 2019

[6]罗非鱼创伤弧菌的分离鉴定和药敏试验. 黎炯,叶星,卢迈新,邓国成,高风英,可小丽,朱华平,黄樟翰. 2011

[7]创伤弧菌FJ03-X2胞外产物对欧洲鳗鲡的致病性和免疫原性分析. 董传甫,林天龙,俞伏松,林能锋. 2006

[8]CpG-ODN 2006对斑马鱼抗创伤弧菌感染的作用. 陈华,李素一,张丽娟,柯翎,陈叙,林晨韬. 2018

[9]应用斑点酶联免疫法快速检测创伤弧菌. 古小莉,李刘冬,陈洁文,黄珂,陈悦鑫. 2014

[10]创伤弧菌ISCOMs疫苗对欧洲鳗鲡细胞免疫的影响. 林能锋,许斌福,曾红,陈强,方冬兰. 2012

[11]创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达. 李素一,吴唯维,李盼,柯翎,许斌福,林晨韬,林天龙,陈叙. 2013

[12]基于vvhA基因检测创伤弧菌实时荧光PCR方法的建立. 李丹丹,徐义刚,邱索平,王昱,高会江,高慎阳. 2016

[13]创伤弧菌浸泡感染对孔雀鱼的影响. 陈秀霞,池洪树,许斌福,陈晨汐,方冬兰,龚晖. 2019

[14]创伤弧菌DPO-PCR检测方法的建立. 李丹丹,徐义刚,王昱,高会江,高慎阳. 2015

[15]水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌多重PCR检测方法的建立. 蒋蔚,易力,陈永军,何再平,白雪瑞,赵梦苏,刘景云,王权. 2016

[16]创伤弧菌FJ03-X2株培养条件的优化研究. 许斌福,陈秀锦,刘晓东,林能锋,刘新华,刘景瑜,林天龙. 2010

[17]应用双抗夹心ELISA法检测皱纹盘鲍致病病原—创伤弧菌的研究. 王崇明,杨冰,宋晓玲,黄偼. 1999

[18]应用双抗夹心ELISA法检测皱纺盘鲍致病病原―创伤弧菌的研究. 王崇明,杨冰. 1999

[19]创伤弧菌外膜蛋白免疫刺激复合物最小免疫剂量测定. 许斌福,龚晖,陈秀锦,田丁,陈强,陈永聪,林天龙. 2012

[20]日本鳗鲡混合感染迟缓爱德华氏菌与创伤弧菌的分离与鉴定. 余露军,李宁求,刘礼辉,付小哲,石存斌,潘厚军,吴淑勤. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序