结核分枝杆菌csd A基因的原核表达及其免疫原性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王华南

作者： 王华南;亓英芳;杜艳芬;刘慧芳;司微;于申业;王加明;杨盛;李素兰;冯拥军;倪洪波;王春来;刘思国

作者机构：

关键词： 结核分枝杆菌;csd A基因;原核表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2010 年 40 卷 12 期

页码： 1232-1235

收录情况： CSCD

摘要： 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 690 bp的csd A (coldshock dead-box protein A)基因,经限制性酶切后,与pET28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中后,重组茵经0.2 mmol/L IPTG诱导表达了csd A蛋白及Ni- His-resin纯化蛋白,经Western-blot分析,鉴定了目的蛋白的反应原性.试验结果表明,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在64 ku处获得一目的条带,具有很好的免疫原性.证实,成功构建了重组表达质粒pET28acsd A,获得了高纯度的重组蛋白,为深入研究csd A蛋白的功能奠定了基础

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