大豆种子形态建成期与成熟期正反抑制消减文库构建及差异表达基因分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 颜克亮

作者: 颜克亮;陈波;姚家玲;周新安;张会芳;魏文辉

作者机构: 华中农业大学生命科学技术学院;中国农业科学院油料作物研究所

关键词: 抑制消减杂交;大豆;种子发育;差异表达基因;实时定量PCR

期刊名称: 武汉大学学报(理学版)

ISSN: 1671-8836

年卷期: 2008 年 02 期

页码: 202-208

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了分析大豆种子形态建成期与成熟期基因差异表达情况,获得在发育过程中可能影响大豆种子形态建成及蛋白质、油脂合成代谢等调控的重要基因,利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建了高含油量大豆品种中豆32开花后15天胚和36天胚正反消减文库.从正反消减文库中挑取克隆,经PCR及点杂交筛选后,从15天胚消减库(正向)和36天胚消减库(反向)中分别挑选了476个和471个有效克隆测序,经BLAST比对归并后,根据测序结果设计基因特异引物,通过半定量PCR和荧光定量PCR检测了13个差异表达基因,其中正向库5个,反向库8个.对这些差异表达基因的组织特异性检测表明,仅发现4-662(蔗糖结合蛋白基因)在胚中特异表达.对这些基因在大豆种子发育过程中的作用进行了讨论.

分类号: Q943.2`S565.1

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