超声波法直接导入外源基因——高效烟草转化系统的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 章力建

作者： 章力建;陈乐玫;袁静;李长公;贾士荣;许宁;赵南明

作者机构：

关键词： 超声波;烟草;遗传转化

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 1991 年 24 卷 02 期

页码： 83-89+98

收录情况： CSCD

摘要： 本文报告一种新的将外源基因导入带壁植物细胞的方法——超声波直接导入外源基因法。将烟草叶片小块置于含pBI121.1质粒的缓冲液中,用声强为0.5w/cm~2的脉冲超声波处理30分钟,培养一天后86%的叶块中检测到有GUS基因的短暂表达,叶片组织的平均转化面积高达60%-70%。处理叶块中的60%在含Kan 100mg/1的分化培养基上再生出Kan抗性芽,对照叶块则在此培养基上全部死亡。经检测Kan抗性小植株叶片中的GUS活性,按外植体总数计算,稳定转化率达22.3%,抽样检测NPTⅡ活性和DNA斑点杂交均显阳性,证明外源基因已整合到烟草DNA中。

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