微小隐孢子虫CPl5-P23-CPl5/60基因的融合表达及抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦培兰

作者： 秦培兰;米荣升;黄燕;周鹏;张国恩;苏庆美;呼高伟;曹薇;陈兆国

作者机构：

关键词： 微小隐孢子虫;CPl5-P23-CPl5／60融合基因;原核表达;重叠延伸PCR;Cryptosporidium parvum; CP15-P23-CP15/60 fusion gene; prokaryotic expression; overlapextension PCR

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2012 年 33 卷 007 期

页码： 54-59

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以微小隐孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CPl5、P23和CPl5/60基因.利用重叠延伸PCR(SOEPCR)将该3段基因片段串联在一起,各基因片段之间引入柔性氨基酸接头(GGGGS)编码基因.将串联基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达载体,转化到大肠埃希茵BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体.结果表明,获得了CPl5-P23-CPl5/60融合基因,并在大肠埃希茵中高效表达,Westernblot显示重组蛋白能被牛抗微小隐孢子虫阳性血清识别,制备的多克隆抗体能被重组蛋白特异性识别,表明获得的重组蛋白具有较好的抗原性.

分类号： S852.42

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