罗非鱼无乳链球菌LrrG-Sip融合基因原核表达载体的构建及表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 曾祖聪

作者: 曾祖聪;曹建萌;卢迈新;可小丽;刘志刚;高风英;朱华平

作者机构:

关键词: 罗非鱼;无乳链球菌;LrrG;Sip;融合基因;原核表达载体

期刊名称: 南方水产科学

ISSN: 2095-0780

年卷期: 2014 年 05 期

页码: 17-23

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: LrrG和表面免疫原性蛋白(Sip)是无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的2种表面蛋白,具有良好的免疫原性。为获得罗非鱼无乳链球菌表面蛋白LrrG和Sip蛋白的融合蛋白,该试验采用基因拼接技术中的双酶切法分2步逐个将Sip和LrrG基因插入pColdⅡ载体中,构建原核表达载体pColdⅡ-LrrG-Sip。将成功构建的融合基因原核表达载体转化感受态细胞BL21(DE3),进行诱导表达条件的优化。结果显示,15℃、IPTG 0.5 mmol·L-1诱导9 h,目的蛋白呈可溶状态的表达量最高。Western Blot检测结果显示LrrG-Sip融合蛋白大小与预测一致(162kDa),说明成功构建了融合基因,为罗非鱼源无乳链球菌亚单位疫苗的研制奠定了基础。

分类号: S943

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