禽源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周继章

作者： 周继章;邱昌庆;张小英;曹小安

作者机构：

关键词： 鹦鹉热衣原体;MOMP基因;腺病毒载体;表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2006 年 36 卷 01 期

页码： 13-17

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 对从疑似禽衣原体病鸡分离鉴定的鹦鹉热衣原体用PCR方法扩增,获得了完整的外膜主蛋白(MOMP)基因,将其克隆到pMD 18-T Simple载体中,用BglⅡ和SalⅠ双酶切出目的基因,并将其与已线性化的pshuttle-CMV穿梭载体连接。然后,将阳性质粒转化入含有腺病毒骨架载体的BJ5183感受态细胞中进行同源重组。将同源重组的腺病毒粒子转入DH5α大肠埃希氏菌增殖。提取同源重组后的腺病毒粒子转染AD-293细胞,待重组腺病毒在AD-293细胞中传代稳定后,经PCR技术检测,扩增到了MOMP目的基因;用间接免疫荧光试验检测,呈阳性反应,证明目的蛋白得到了表达。经测定,重组腺病毒的效价达3.9×1010PFU/mL。

分类号： S852.67

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