牛分枝杆菌esat6和cfp10蛋白的表达及在临床检测中的应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 解晓莉
作者: 解晓莉;韩猛;刘来兴;王基隆;杨美;张云飞;丁家波;张亮;杨宏军
作者机构:
关键词: 牛分枝杆菌;esat6和cfp10蛋白;皮肤变态反应;IFN-γ释放试验
期刊名称: 山东农业科学
ISSN: 1001-4942
年卷期: 2017 年 11 期
页码: 120-123
摘要: 本研究以牛分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,扩增esat6和cfp10基因,构建重组表达载体p ET-32a(+)-esat6和p ET-32a(+)-cfp10,并通过原核表达系统分别表达重组esat6和cfp10蛋白,经Ni-NTA亲和层析法纯化后,对目的蛋白进行SDS-PAGE和Western blot验证,BCA法测定目的蛋白浓度,最后将east6和cfp10蛋白混合后用于牛结核病临床检测,并对检测数据进行分析。结果表明,牛分枝杆菌esat6和cfp10蛋白在大肠杆菌系统中获得高效表达;其混合蛋白应用于结核病检测具有较高的特异性,且在皮肤变态反应和IFN-γ释放试验两种检测方法中具有较高的符合率。说明相较于提纯结核菌素(PPD),esat6和cfp10混合蛋白具有较高的特异性和稳定性,将有希望替代PPD用于牛结核病检测。
分类号: S852.618
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