基于SYBRGreen检测微小隐孢子虫的实时荧光定量PCR方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陈甫

作者: 陈甫;黄克和

作者机构:

关键词: 实时荧光定量PCR;SYBRGreen;微小隐孢子虫;检测;18srRNA

期刊名称: 中国病原生物学杂志

ISSN:

年卷期: 2009 年 03 期

页码: 191-195

收录情况: CSCD

摘要: 目的建立一种方便快捷的检测微小隐孢子虫的实时荧光定量PCR(Real-timePCR)方法。方法根据GenBank公布的微小隐孢子虫18srRNA基因序列设计1对引物,通过质粒DNA和卵囊检测标准曲线的绘制及特异性和重复性的研究,建立检测微小隐孢子虫的基于SYBRGreen的Real-timePCR方法,进而对奶牛粪便进行检测。结果建立的Real-timePCR法对检测微小隐孢子虫具有很高的特异性,质粒DNA和卵囊的检测阈值分别达到1个拷贝和10个卵囊,奶牛粪便阳性率为25.93%(21/81),高于普通PCR检测率20.99%(17/80)。结论建立的Real-timePCR方法简...

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