葡萄霜霉菌效应因子PvCRN91功能分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 孙大运

作者: 孙大运;刘露露;郭泽西;韦淑梅;潘凤英;曲俊杰;尹玲

作者机构:

关键词: 葡萄霜霉菌;PvCRN91基因;效应因子;Crinkler结构域;防卫反应

期刊名称: 南方农业学报

ISSN: 2095-1191

年卷期: 2025 年 56 卷 002 期

页码: 533-543

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】克隆葡萄霜霉菌PvCRN91基因并研究其功能,为揭示葡萄霜霉菌的致病机制提供理论参考。【方法】利用分子克隆技术扩增PvCRN91基因全长,并分析其编码蛋白的生物信息学特征。通过本氏烟上瞬时表达效应蛋白PvCRN91,观察其在烟草叶片上的表现和对马铃薯疫霉激发子INF1和小鼠促凋亡蛋白BAX触发细胞坏死的影响。构建pBWA(V)HS-PvCRN91-GFP融合表达载体,在葡萄叶片和烟草叶片瞬时表达,并分别接种葡萄霜霉菌和烟草疫霉,分析其促进病原菌侵染的能力。构建pBI221-PvCRN91-GFP表达载体,并在烟草原生质体瞬时表达,分析PvCRN91蛋白的亚细胞定位情况。构建pBWA(V)HS-PvCRN91-3×Flag融合表达载体,通过免疫沉淀—质谱联用技术(IP-MS)方法筛选与PvCRN91互作的靶蛋白。【结果】PvCRN91基因编码区(CDS)全长351 bp,编码116个氨基酸残基,蛋白相对分子量约13.03 kD,不含有信号肽、核定位序列(NLS)和跨膜结构域,含有1个Crinkler结构域和consen-sus disorder prediction区域;PvCRN91的二级结构含有α-螺旋(31.90%)、延伸链(22.41%)和无规则卷曲(45.69%)。序列比对发现,在多种疫霉菌、水霉菌、霜霉菌和丝囊霉菌中均存在与PvCRN91蛋白一致性较高(56.60%~74.77%)的序列,推测PvCRN91是一个保守的效应因子。PvCRN91蛋白不具有触发烟草细胞坏死的能力,但能完全抑制INF1和BAX诱导的细胞程序性死亡(PCD)反应。PvCRN91效应因子可促进葡萄霜霉菌和烟草疫霉菌的侵染。PvCRN91蛋白亚细胞定位于细胞质和细胞核,推测其在细胞质或细胞核中与寄主靶蛋白互作,抑制寄主的免疫反应。IP-MS方法初步筛选到252个可能与PvCRN91互作的靶蛋白,通过多个代谢途径影响烟草的生理生化和防御反应。【结论】PvCRN91是一个毒力因子,可能在细胞质或细胞核中操纵寄主的靶蛋白,降低植物的防卫反应,促进病原菌的侵染。

分类号: S436.631.1

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