检测产志贺毒素大肠杆菌抗体的间接ELISA试剂盒的研制

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张雪寒

作者： 张雪寒;张强;张碧成;汪伟;倪艳秀;温立斌;李彬;周俊明;何孔旺;周萍

作者机构：

关键词： 致病性大肠杆菌;紧密素;间接ELISA

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2016 年 29 卷 11 期

页码： 2738-2745

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在研制一种以紧密素为检测靶标的间接ELISA技术,检测血清中产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxigenic Escherichia coli,STEC)的抗体水平。根据紧密素27个亚型的N端保守序列,体外表达390~543 aa片段制备包被抗原,通过敏感性、特异性、重复性和稳定性实验,建立检测STEC的抗体的间接EIISA方法。经优化筛选的间接ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度3 ng/孔,待检血清稀释比例1∶200,HRP-兔抗羊Ig G、HRP-兔抗牛Ig G的工作浓度均为1∶15000,5%脱脂奶封闭l h,底物作用时间10min,用于牛、羊疫苗抗体检测或者STEC大肠杆菌感染的监测。

分类号： S854.43`R446.6

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