牛分枝杆菌mpb64基因的克隆、鉴定及其表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张秀华

作者： 张秀华;刘思国;宫强;王春来;王牟平;彭永刚;沈国顺;郭洋;郭设平

作者机构：

关键词： 牛分枝杆菌;mpb64基因;克隆;表达

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1003-3505

年卷期： 2005 年 25 卷 04 期

页码： 43-46

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增mpb64基因,纯化PCR产物并与 pDM18-T载体连接、转化,经酶切及核苷酸序列鉴定为正确后,酶切产物亚克隆到原核表达载体 pET30a(+)的KpnI／EcoRI位点,构建重组表达质粒pET30a+-mpb64,转化到大肠杆菌DE3内,以 IPTG进行诱导,终浓度为1mmol／L,诱导产物进行SDS-PAGE电泳。结果表明,PCR方法成功扩增 出mpb64基因,核苷酸序列测定验证了其正确性,重组表达质粒表达的pET30a+-mpb64融合蛋白 相对分子量为30.4kDa,与实测相符。牛分枝杆菌pET30a+-mpb64的成功表达为牛结核病的诊断 及新型疫苗的研究奠定了基础。

分类号： S852.618

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