番茄环纹斑点病毒(TZSV)实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐弢

作者： 徐弢;郑雪;张晓林;陈永对;穆野;陈勇;郑宽瑜;赵立华;刘小烛;张洁

作者机构：

关键词： 番茄环纹斑点病毒;实时荧光定量PCR;检测方法

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2017 年 07 期

页码： 139-144

摘要： 本研究根据番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)保守N基因(Gen Bank登录号:13YV639)设计一对特异性引物,通过优化反应条件和反应体系,构建了TZSV的SYBR Green RT-qPCR检测方法。该方法稳定可靠,组内和组间的变异系数都小于2%;标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.39和0.996,扩增效率为97.44%;最低能检测到1.07×10~4copies/μL的阳性质粒,灵敏度为常规PCR的1 000倍。同时利用构建的RT-qPCR方法检测TSWV、TNSa V、PCSV和TZSV四种病毒,只有TZSV有特异扩增曲线,表明该方法特异性良好。本研究构建的RT-qPCR方法能够为TZSV的早期预警与动态监测提供可靠的技术支撑。

分类号： S432.41

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