基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈伟业

作者： 陈伟业;葛金英;肇慧君;胡森;温志远;曹文雁;王喜军;黄克和;步志高

作者机构：

关键词： 鸡I型干扰素;生物活性检测;鸡Mx启动子;萤光素酶

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2008 年 39 卷 01 期

页码： 123-128

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。

分类号： S852.4

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