A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1在杆状病毒系统中的表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈鹏飞

作者： 陈鹏飞;刘新生;周鹏;方玉珍;潘丽;张中旺;吕建亮;王永录;张永光

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;VP1蛋白;杆状病毒;表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 03 期

页码： 269-274

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为在杆状病毒表达系统中表达口蹄疫病毒(FM D V)结构蛋白VP1,利用限制性酶切位点将VP1基因插入到杆状病毒表达载体pFastBacHTB,得到重组转移载体p FastBacHTB-VP1,并将其转化至DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒rBacHTB-VP1,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)鉴定结构蛋白VP1的表达情况。IFA结果表明结构蛋白VP1能够在昆虫细胞中表达;Western-blot检测到32 ku左右的表达产物,与预期结果相符,且能够被A型FMDV豚鼠阳性超免疫血清所识别。上述结果表明,经杆状病毒真核表达系统表达的可溶性蛋白VP1具有良好的反应原性,为进一步研究A型口蹄疫病毒结构蛋白的免疫原性以及研制新型口蹄疫亚单位疫苗提供了实验依据。

分类号： S852.65

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