Asia 1型口蹄疫病毒VP1基因的表达鉴定及其多抗制备
文献类型: 中文期刊
第一作者: 朱远茂
作者: 朱远茂;任宪刚;史鸿飞;高欲燃;于作;冯军科;相文华;薛飞
作者机构:
关键词: Asia I口蹄疫病毒;VP1基因;多克隆抗体
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2010 年 32 卷 04 期
页码: 285-288
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究旨在表达口蹄疫病毒(FMDV)的VP1全基因并制备特异性的多克隆抗体。利用PCR方法扩增Asia 1 IND 49197株VP1全基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为31.6ku,以包涵体的形式存在。通过Ni-NTA Purification System纯化后进行western blot和间接ELISA分析,结果显示重组蛋白能够被FMD阳性血清识别,具有良好的反应性。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价为1∶20480,病毒中和试验测定抗体效价为1∶64。本研究所表达的VP1蛋白可用于开发检测Asia1口蹄疫抗体的诊断试剂,所制备的多克隆抗体为进一步研究VP1的结构、功能以及抗原表位的鉴定提供了条件。
分类号: S852.65
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