农杆菌浸润瞬时表达分析番木瓜miR162a的研究(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 彭军

作者： 彭军;杨腊英;王国芬;郭立佳;汪军;黄俊生

作者机构：

关键词： 番木瓜;瞬时表达分析;农杆菌浸润;microRNA

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2011 年 32 卷 10 期

页码： 44-48

收录情况： CSCD

摘要： 农杆菌浸润瞬时表达方法不仅在蛋白互作、鉴定基因沉默抑制子及基因功能研究方面得到广泛应用,目前还应用在小RNA的研究中。在对植物microRNA的研究中,农杆菌浸润方法通过将将转基因导入农杆菌浸润本生烟瞬时表达,可以快速、稳定地对植物microRNA进行检测和鉴定,样品在几天内就可分析完成,比获得稳定遗传的转基因有优势。笔者借鉴国外拟南芥microRNA瞬时表达分析的方法,克隆了番木瓜的miR62a前体序列连接到双元表达载体pSuper1300上构建成35S::cpa-miR162a质粒,导入农杆菌GV3101后浸润本生烟,浸润后48 h提取本生烟叶片总RNA后通过miRNA northern blot检测到miR162a,而本生烟和番木瓜自身则无法检测到低丰度的miR162a。本文介绍的农杆菌浸润瞬时表达方法能够在体外加工产生成熟的miRNA,该技术有助于对microRNA的结构-功能的相关性及靶标验证进一步研究。

分类号： S667.9

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