斯里兰卡木薯花叶病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 黄境珊
作者: 黄境珊;王国芬;时涛;李超萍;陈奕鹏;蔡吉苗;李博勋;刘先宝;黄贵修
作者机构:
关键词: 木薯;斯里兰卡木薯花叶病毒;TaqMan荧光定量PCR
期刊名称: 热带作物学报
ISSN: 1000-2561
年卷期: 2025 年 46 卷 009 期
页码: 2056-2062
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 由斯里兰卡木薯花叶病毒(Sri Lankan cassava mosaic virus,SLCMV)侵染引起的斯里兰卡木薯花叶病是近年来我国木薯种植中新发的危险性病害。现有检测技术存在灵敏度低、效率不高等不足,限制了相关工作的开展。本研究根据病毒基因序列设计引物和探针,制备阳性质粒标准品,建立SLCMV的TaqMan荧光定量检测技术,并对其应用效果等进行验证。结果发现,该方法仅对SLCMV DNA样品产生特异性荧光信号,对阳性质粒标准品的最低检出量为4.5×10~1 copies/μL。标准曲线显示,C_t值与拷贝数的对数呈良好线性关系,曲线斜率为-3.1312,相关系数(R2)为0.9969,扩增效率(E)为97.9%,标准曲线方程为y=-3.1312x+34.599。利用该技术对广西和福建的2个木薯种植园供试样品进行检测,叶片阳性检出率分别达95.45%和78.57%,最低检测拷贝数为1.45×10~5 copies/g,而田间烟粉虱携毒率为86%,最低带毒量为9.42×10~4 copies/头。该技术具有良好的灵敏度、特异性和重复性,可为该病的田间鉴定、早期诊断、无毒种茎评价等监控工作提供有效的技术支持。
分类号: S435.33
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