大鼠细小病毒VP2原核表达及间接ELISA方法建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 霍娜

作者： 霍娜;姚威;于婉琪;魏晓锋;萧飒;陈鸿军

作者机构：

关键词： 大鼠细小病毒;VP2;原核表达;间接酶联免疫吸附试验

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2018 年 06 期

页码： 53-57

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究以大鼠细小病毒(Rat parvovirus,RPV)VP2基因的原核表达产物为抗原建立检测RPV抗体的间接ELISA方法。通过比对分析大鼠细小病毒不同毒株的VP2蛋白序列,我们筛选出了RPV株VP2蛋白上长度为378 bp的特异性成熟肽序列,随后构建了pET30a原核表达体系,借助His标签对重组表达产物进行纯化,以纯化鉴定后的表达产物为抗原,免疫Balb/c小鼠制备多抗血清并建立检测大鼠细小病毒血清抗体的间接VP2-ELISA方法。结果显示,抗原包被质量浓度为0.28μg/mL,阳性判定标准初步定为OD450≥0.5,与H-1株和KRV株的阳性血清存在一定的交叉反应,批内试验变异系数小于10%。本研究建立的RPV VP2-iELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于大鼠细小病毒感染的血清抗体检测。

分类号： S852.65

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