靶向新城疫病毒L基因(功能区)的siRNA抑制新城疫病毒的复制

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦红刚

作者： 秦红刚;孟庆文;刘丹;李文超;韩凌霞;姜骞;刘家森;曲连东

作者机构：

关键词： NDV;siRNA;RNAi;L基因;抑制

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2008 年 30 卷 08 期

页码： 579-583

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究以新城疫病毒(NDV)L蛋白的功能区(P1595、P2103和P3277酶活性中心结构区)序列为RNAi的靶位点,设计、构建了3个特异性的siRNA的真核表达质粒pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9,转染到CEF细胞后接种NDV,间接免疫荧光实验结果显示:pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9均能抑制NDV抗原蛋白的表达;Real-timePCR检测到转染pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9的CEF细胞中L基因的转录水平分别降低79.1%、93.9%和91.3%,P基因的转录水平分别降低73%、86.3%和89.8%;病毒滴度测定表明转染pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9质粒的细胞培养上清中病毒的滴度分别低2.19、3.16和5.24倍。本研究中3个特异性的siRNA均能抑制NDV的复制、增殖,表明P1595、P2103和P3277这3个区域对于L蛋白发挥RNA依赖的RNA聚合酶的功能具有重要作用。

分类号： S852.659

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