文献类型： 中文期刊
第一作者： 李沛恒
作者： 李沛恒;邹万成;陈竞;张国庆;崔春梅;蒋嵘;金宁一;李昌
作者机构：
关键词： 猫IFN-α;构建与表达;抗病毒活性;干扰素刺激基因
期刊名称： 中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2024 年 32 卷 006 期
页码： 17-24
摘要： 本文为探究猫IFN-α(FeIFN-α)在体外MDCK、F81细胞中的抗病毒效果，为后续体内实验提供参考。根据猫IFN-α(GenBank登录号：NP＿001027000.1)序列并添加6×His标签，合成后通过pUC57载体进行克隆，然后亚克隆至pcDNA3.1载体，获得含有目的基因的真核表达质粒，转染293T细胞，通过Western blot检测FeIFN-α的表达情况。通过重组绿色荧光蛋白水疱性口炎病毒(VSV-GFP)感染细胞实验，利用结晶紫染色法进行FeIFN-α抗病毒活性初步分析并确定最佳稀释倍数，通过荧光观察法、流式细胞术检测其抗病毒活性，最后通过相对荧光定量qPCR技术检测猫IFN-α对干扰素刺激基因(ISG15、MX1、OAS1)的调控作用。结果表明，成功表达FeIFN-α并具有生物学活性，且可以明显抑制VSV-GFP病毒侵染F81、MDCK细胞，qPCR结果分析表明猫IFN-α在F81、MDCK细胞中均可有效诱导ISG15、MX1、OAS1基因上调。本研究结果为后续犬猫体内抗病毒实验提供参考依据。
分类号： S859.7
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