猫细小病毒适配体的筛选与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 董丽丽

作者： 董丽丽;许鑫燕;刘迪;郑亚婷;康洪涛;姜骞;杨鸣发;刘家森;曲连东

作者机构：

关键词： 猫细小病毒;适配体;SELEX技术

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 008 期

页码： 826-831

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为筛选猫细小病毒（FPV）特异性核酸适配体,本研究利用体外指数富集的配体系统进化技术（SELEX）,从80 nt的单链DNA随机文库中筛选出与FPV高亲和力、高特异性结合的核酸适配体。对FPV适配体共进行14轮筛选,采用dot blot鉴定,确定其中的Apt27和Apt52为候选适配体。MTT试验表明,Apt27和Apt52对CRFK细胞（猫肾细胞）无毒性作用。利用酶联寡核苷酸法（ELONA）测定Apt27和Apt52的解离常数,结果显示分别为18.3249±7.1723 nmol/L和24.7882±10.0067 nmol/L。同时采用dot blot、间接免疫荧光试验（IFA）方法检测Apt27和Apt52对不同病毒的结合情况,结果显示其对猫杯状病毒、猫疱疹病毒的结合力弱,而对FPV的结合能力较强。预测二者二级结构可见,Apt27和Apt52均具有环状、发卡状结构,其中茎环结构可能为适配体特异性识别FPV的基本结构。本研究首次筛选到特异性识别FPV的适配体序列,为FPV的检测与治疗制剂的开发提供了新思路。

分类号： S852.651

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