小菜蛾UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶基因的克隆、表达及功能研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李恒
作者: 李恒;田厚军;林硕;陈艺欣;魏辉;陈勇
作者机构:
关键词: 小菜蛾;RNA干扰;几丁质;UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶;表达谱
期刊名称: 生物安全学报(中英文)
ISSN: 2095-1787
年卷期: 2024 年 33 卷 004 期
页码: 415-422
收录情况: CSCD
摘要: 【目的】克隆小菜蛾几丁质合成酶基因Px UAP并阐明其功能。【方法】基于小菜蛾基因组信息,利用RT-PCR克隆小菜蛾Px UAP基因的c DNA序列,并应用荧光定量PCR和RNA干扰技术分析该基因的表达模式及功能。【结果】Px UAP (Gen Bank登录号:OR659549)开放阅读框长度为1467 bp,预测编码488个氨基酸,蛋白分子质量为54.985 ku,理论等电点为6.12;与金凤蝶UAP (KPJ20218.1)同源蛋白亲缘关系较近,氨基酸同源性为80.33%。发育表达谱结果表明,Px UAP在小菜蛾各个发育阶段均有表达,在雄成虫期的表达量最高;组织表达谱结果表明,Px UAP在雌成虫足和翅膀的表达量最高。RNAi结果表明,与注射ds GFP对照组相比,注射ds Px UAP显著降低了靶标基因和几丁质合成酶Px CHSA基因的表达量,且Px CHSB基因在24和48 h的表达量也显著下降;注射ds Px UAP的小菜蛾大部分无法化蛹,蛹壳出现皱缩等畸形现象,并在注射后168 h全部死亡。【结论】Px UAP是小菜蛾几丁质合成酶通路中的关键调控基因,对小菜蛾生长发育起至关重要的作用。
分类号: S433
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