芒果果肉cDNA文库构建及MiCTR1互作蛋白的筛选
文献类型: 中文期刊
第一作者: 袁芳
作者: 袁芳;王春艳;李丽
作者机构:
关键词: 芒果;果实成熟;酵母双杂交;MiCTR1;蛋白互作
期刊名称: 现代食品科技
ISSN: 1673-9078
年卷期: 2025 年 41 卷 005 期
页码: 61-67
收录情况: 北大核心
摘要: 该文旨在鉴定芒果MiCTR1的互作蛋白,深入探究MiCTR1调控芒果果实后熟过程的分子机理。以‘台农1号’芒果为材料,建立芒果果肉的cDNA文库,构建诱饵载体,对其自激活检测后,从文库中筛选与MiCTR1互作的蛋白,并进行回转验证,通过NCBI网站进行序列比对,明确互作蛋白的功能。结果表明:所构建的cDNA初级和次级文库的库容量分别达到了5.7×10~6和1.2×10~7 CFU/mL,重组率100%,插入片段长度为1 000~2 000 bp,诱饵载体pGBKT7-MiCTRI不存在自激活。从酵母双杂交文库中筛选到21个初始阳性克隆,经回转验证后最终获得20个与MiCTR1互作的蛋白,主要功能涉及遗传代谢,类叶绿素、维生素E的合成,物质的转运,物质代谢,细胞生长,光合作用。综上,该研究构建的芒果果实cDNA文库质量较高,完整性好,酵母双杂交筛库技术鉴定出多个与芒果MiCTR1互作的蛋白,并且解析其生物功能,为探究MiCTR1调控芒果果实后熟的分子机制奠定理论基础。
分类号: TS255.1
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