中、意蜂Atg12基因克隆表达及生物信息学分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 涂洋洋

作者： 涂洋洋;武江利;吴鹏杰;谭静;于慧敏;徐进;郭岳琴;王丽华;徐书法

作者机构：

关键词： 中华蜜蜂;意大利蜜蜂;Atg12基因;克隆;原核表达;抗螨

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2019 年 3 期

页码： 643-651

摘要： 试验旨在探究自噬相关基因Atg12(autophagy-related 12 gene)在中华蜜蜂(中蜂)、意大利蜜蜂(意蜂)中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考.参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因序列(登录号:XM017048509.1)设计引物,扩增中、意蜂头部组织Atg12基因,并对其进行克隆、测序、原核表达及其氨基酸序列和蛋白结构分析,同时采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在中、意蜂头部组织中的表达差异.结果显示,本试验成功扩增出大小为450 bp的目的片段,并表达出大小约42 ku重组蛋白;遗传进化树分析表明,在Atg12基因进化过程中,中蜂(Apis cerana cerana)、意蜂(Apis mellifera)、大蜜蜂(Apis dorsata)和小蜜蜂(Apis florea)亲缘关系较近;重组蛋白生物信息学分析显示,该蛋白的二级结构中共含有6个多肽结合位点、6个β-折叠和4个α-螺旋,分子质量约为16.13 ku,等电点为6.73;实时荧光定量PCR结果显示,Atg12基因在中蜂头部组织中表达极显著高于意蜂(P<0.01).本试验结果为后续深入研究Atg12基因在中蜂抗螨上的作用机制提供了参考.

分类号： S891

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