毛皮兽阿留申病毒可视化交叉等温扩增检测方法的建立及初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 韦韬

作者: 韦韬;吴艳虹;马瑞芳;丛丽;岳志刚;赵永强;肖家美;邵西群

作者机构:

关键词: 水貂阿留申病毒;阿留申病毒;交叉引物等温扩增;可视化检测

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2019 年 6 期

页码: 671-677

摘要: 为建立快速、特异、灵敏的毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法(CPA),以阿留申病毒属内病毒序列为参考,在VP2序列高变区保守区段设计合成4条特异引物.通过优化CPA反应条件,建立了毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法,并进行了特异性、敏感性试验以及对临床样品的检测.结果显示,该方法可扩增水貂阿留申病毒(AMDV)和狐貉阿留申病毒(RFAV),对犬科和水貂组织以及常见病毒无特异性反应;对AMDV、RFAV可视化检测下限分别为5.38*10~2copies/μL、5. 93*10~2copies/μL;对83份临床样品的检测结果显示,其中有16份PCR检测为阴性,CPA、qPCR检测为阳性的样品,表明CPA检测方法优于传统PCR.本试验建立了一种高敏感性、特异性检测毛皮兽阿留申病毒的方法,通过添加荧光染料实现了可视化检测,它更加适合基层兽医站、养殖场进行快速核酸检测.

分类号: S852.65

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