应用CRISPR/Cas9敲除HeLa细胞DDX21基因对新城疫病毒复制的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 武炜

作者： 武炜;王飒;孟春春;仇旭升;廖瑛;谭磊;宋翠萍;刘炜玮;孙英杰;丁铲

作者机构：

关键词： CRISPR/Cas9;DDX21;新城疫病毒;复制

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2019 年 7 期

页码： 1433-1440

摘要： 解旋酶家族是一类对所有生物都至关重要的酶,主要功能是基因解旋,DEAD/H-box家族RNA解旋酶是一类重要的解旋酶.DEAD-box RNA解旋酶DDX21被证实可能调控宿主细胞先天性免疫.新城疫病毒(NDV)是一种对养禽业危害严重的病原,NDV能够通过多种手段调控宿主先天性免疫,为了探讨DDX21如何调控NDV复制,本研究应用CRISPR/Cas9系统建立DDX21基因敲除的HeLa细胞系,并验证其对NDV复制的影响.针对DDX21基因共设计6条sgRNA,构建敲除载体并电转染细胞,通过药物筛选、亚克隆筛选后,以PCR和Western blot进行敲除效率的双重鉴定,并比较野生型和DDX21敲除细胞中NDV的复制效率.结果显示,由于DDX21对细胞生长至关重要,因此仅获得一株DDX21杂合子敲除细胞,Western blot结果显示DDX21表达量被显著抑制,NDV对在敲除细胞上的复制滴度明显低于野生型细胞,说明DDX21发挥正调控NDV复制的作用,本试验为DDX21调控抗病毒先天性免疫研究奠定了基础.

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]Sec62/Sec63复合物对乙型脑炎病毒在HEK-293细胞中复制影响的研究. 王晗,刘靖,钟杰,步志高,华荣虹. 2020

[2]弓形虫Tgcsp2基因敲除株的表型和毒力. 牛美容,李法财,谢世臣,聂兰碧,朱兴全,赵光辉. 2020

[3]miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响. 王伟东,滕蔓,郑鹿平,刘金玲,张文凯,李林燕,张志会,樊剑鸣,罗俊. 2023

[4]HeLa细胞中泛素蛋白酶体系统对新城疫病毒复制的影响. 曲昱蓉,詹媛,仇旭升,谭磊,孙英杰,宋翠萍,丁铲. 2014

[5]新城疫病毒复制对其溶瘤作用影响的初步分析. 吴寒光,孙军峰,梁雨萌,刘胜旺,李海. 2020

[6]DF-1细胞中泛素-蛋白酶体系统对新城疫病毒复制的影响. 曲昱蓉,詹媛,仇旭升,谭磊,孙英杰,宋翠萍,孟春,丁铲. 2017

[7]新城疫病毒毒力分子机制研究进展. 于洋,封振,何孔旺,仇旭升,丁铲. 2013

[8]鸡G3BP1在新城疫病毒感染诱导应激颗粒形成过程中的作用. 张频,孙英杰,郑航,毛旭明,仇旭升,谭磊,孟春春,宋翠萍,廖瑛,丁铲,马卫明. 2017

[9]受体酪氨酸激酶AXL影响新城疫病毒复制及干扰素刺激基因产生的研究. 徐丘璠,黄美珍,黄新月,仇旭升,孙英杰,廖瑛,宋翠萍,刘炜玮,丁铲,谭磊,任涛. 2021

[10]利用CRISPR/Cas9技术敲除TLR3基因及其影响NDV复制的研究. 邵玉乐,许曼,王辉,曾为俊,鲁国涛,赵丽丽,陈洪岩,刘建华,孟庆文. 2019

[11]猪繁殖与呼吸综合征病毒3''-UTR碱基缺失对病毒复制影响的初步研究. 熊俊垚,赵款,于芳,杨勇博,田志军,蔡雪辉,安同庆. 2019

[12]CAML蛋白对流感病毒复制调控机制的初步研究. 孔凡迪,王广文,严娅,温霞,王倩,赵玉辉,梁立滨,李俊平,李呈军,陈化兰,姜丽. 2021

[13]HgN2亚型禽流感病毒的序列分析及对哺乳动物致病力研究. 王金良,李旭勇,范俊,郭晶,邓国华,施建忠,陈化兰. 2013

[14]MicroRNA-98促进猪圆环病毒2型在3D4/21细胞中的复制. 王小敏,徐祥兰,徐鹏,王兴开,惠禄露,范红结,何孔旺. 2020

[15]疱疹病毒的示踪技术:看到了什么?还能看到什么?. 王亚林,仇华吉,孙元. 2018

[16]Gα12蛋白抑制口蹄疫病毒在PK-15细胞上复制. 王志芳,张伟,杨帆,魏婷,郑海学. 2020

[17]两株EA H1N1亚型猪流感病毒在豚鼠体内的复制和传播能力评估. 陶世宇,王增,陈艳,杨焕良,孔晖晖,陈化兰,胡永浩. 2016

[18]H9N2亚型禽流感病毒的序列分析及对哺乳动物致病力研究. 王金良,李旭勇,范俊,郭晶,邓国华,施建忠,陈化兰. 2013

[19]不同H5N1亚型禽流感病毒在豚鼠体内的复制和传播能力评估. 张莹,高玉伟,邓国华,姜永萍,樊树芳,钟功勋,关云涛,陈化兰. 2010

[20]非洲绿猴FILIP1L真核表达质粒的构建及其抑制PEDV复制的研究. 汤学超,李运川,张雪寒,范宝超,朱雪蛟,周金柱,赵永祥,郭容利,李彬,李鹏. 2023

作者其他论文 更多>>

微信小程序