牛支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 翟肖辉

作者： 翟肖辉;王方国;郝华芳;颜新敏;陈胜利;Hussam Askar Mohamad;朱建勋;储岳峰

作者机构：

关键词： 牛支原体;p80基因;TaqMan探针;实时荧光定量PCR;特异性;敏感性

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2019 年 8 期

页码： 105-109

摘要： 以牛支原体p80基因为靶基因,设计特异性引物与探针,优化反应体系,建立了牛支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR(TaqMan real-time PCR)检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性评估以及临床样本检测.结果显示,特异性试验中,牛支原体2个菌株Cq值均小于18,其余13个非牛支原体菌株Cq值均大于36;敏感性试验中,最低可检3.89拷贝/μL靶DNA,是普通PCR的10~4倍(普通PCR 3.89*10~4拷贝/μL);重复性试验中,组内、组间重复的变异系数均小于1%;44份牛的临床样品利用TaqMan real time PCR检出6份阳性(阳性率为13.64%),分离培养鉴定检出7份阳性,普通PCR检测全部阴性.本研究建立了一种敏感、特异、稳定的牛支原体TaqMan real time PCR检测方法,可用于牛支原体的快速诊断和核酸定量检测.

分类号： S852.62

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