表达EGFP标签的重组血清4型禽腺病毒的构建及评价
文献类型: 中文期刊
第一作者: 柴冬华
作者: 柴冬华;邵昱昊;李慧昕;刘胜旺
作者机构:
关键词: 禽腺病毒;血清4型;重组病毒;绿色荧光蛋白标签
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2019 年 8 期
页码: 998-1005
摘要: 我国当前流行的禽腺病毒血清4型(FAdV-4)毒株与国外毒株相比存在自然缺失.为了解我国流行的FAdV-4毒株的复制能力和特点以及病毒毒力的增强机制,本研究以我国当前流行的基因组3′端自然缺失株HN/151025为亲本病毒,采用同源重组技术,在HN/151025毒株基因组35430~35431自然缺失位点插入EGFP表达盒,构建带有EGFP标签的重组病毒rHN-△35430-EGFP.获得的重组病毒在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,重组病毒在LMH细胞连续传代5代,EGFP基因随病毒的传代而稳定遗传,且EGFP蛋白稳定表达.病毒生长曲线测定结果显示,带有EGFP标签的重组病毒与亲本病毒的生长动力学趋势基本一致,均在接种后第96小时病毒滴度达到高峰,但是重组病毒滴度与亲本病毒差异显著(P<0.05).对重组病毒感染细胞能力进行评价,结果表明,表达荧光信号的细胞比例从感染后第24小时逐渐增多,至感染后第96小时达到高峰,该结果与病毒生长曲线结果一致.本研究结果表明,FAdV-4病毒基因组3′端可作为标签基因插入位点,为进一步研究病毒复制和感染机制奠定基础.
分类号: S852.65
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