霍乱弧菌三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 万莹

作者： 万莹;陈永军;任亚玲;王亚磊;王权;蒋蔚

作者机构：

关键词： 霍乱弧菌;ctx;hly;ompW;三重荧光定量PCR

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2019 年 9 期

页码： 1143-1151

摘要： 为建立一种基于TaqMan探针法定量检测霍乱弧菌的三重荧光定量PCR方法,以霍乱弧菌种特异性基因ompW和毒力基因ctx、hly为靶基因,分别设计特异性引物及相应的TaqMan探针.在ompW、ctx、hly探针的5'端分别标记CY5、FAM、HEX荧光报告基团,3'端均标记BHQ1荧光淬灭基团.结果显示,本试验建立的三重荧光定量PCR方法与其他菌株无交叉反应,其最低检出限达到了10 CFU/m L,重复性试验中每组变异系数均小于1.4%;检测人工染菌的虾肉和贝类样品时,最低检出限也达到1*102CFU/m L.结果表明,本实验室建立的三重荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的特点,是高通量检测致病性霍乱弧菌的有效手段.

分类号： S852.61

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