聚乙二醇(PEG)介导的甜瓜蔓枯病菌的转化(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 任海英

作者： 任海英;李岗;戚行江;梁森苗;郑锡良

作者机构：

关键词： 甜瓜蔓枯病菌;原生质体转化;聚乙二醇;转化效率;稳定性

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2013 年 21 卷 08 期

页码： 965-973

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 蔓枯病是当前危害瓜类的主要病害,但是蔓枯病菌(Didymella bryoniae)病原学研究还非常落后,关于该菌功能基因的研究报道还较少。为了建立聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)介导的甜瓜蔓枯病菌原生质体遗传转化体系,本研究利用带有潮霉素B磷酸转移酶(hph)基因的质粒pSGate1为载体,通过PEG(分子量3350)介导的融合法转化蔓枯病菌株ZJDB32。将病菌分生孢子于PDB培养液(200g/L马铃薯煎汁,20g/L葡萄糖)内震荡培养20h,然后收集产生的幼嫩菌丝,在10mg/mL lysing enzyme+5mg/mL driselase酶液内28℃酶解3h,每克湿菌丝能产生3.8×107个原生质体。PEG介导融合转化pSGate1至D.bryoniae原生质体,每毫克ZJDB32的DNA转化效率最高能得到1230个转化子。结果表明,20个代表性的ZJDB32的转化子继代4次后其潮霉素抗性、生长速率、产孢量和致病性与野生型都没有明显变异,这些转化子可以进一步用于相关功能研究。因此,该转化体系的建立为甜瓜蔓枯病菌功能基因的深入研究提供了基础资料。

分类号： S436.5

  • 相关文献

[1]玉米生长条件对玉米原生质体转化的影响研究. 谢礼,宗娜,赵军. 2014

[2]农杆菌介导的甜瓜蔓枯病菌遗传转化体系的建立. 任海英,方丽,李岗,茹水江,王汉荣. 2010

[3]粉红粘帚霉67-1转几丁质酶基因转化子生物学特性及高效工程菌株的筛选. 谢响明,李世东. 2012

[4]广谱拮抗菌B96-Ⅱ的分子鉴定及GFP标记. 郝变青,马利平,乔雄梧. 2009

[5]香菇ras和gpd启动子的克隆与功能鉴定. 于晓玲,林俊芳,郭丽琼,王树昌. 2005

[6]限制性内切酶介导的粉红粘帚霉67-1转化体系构建. 姜杰,孙漫红,谢响明,李世东. 2013

[7]西瓜尖孢镰刀菌FOV-135的绿色荧光蛋白基因转化. 肖荣凤,朱育菁,李燕丹,黄素芳,刘波. 2009

[8]尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种红色荧光蛋白基因转化. 谢德啸,羊玉花,周端咏,郭立佳,彭军,黄小娟,齐兴柱,黄俊生. 2012

[9]几株尖孢镰刀菌的绿色荧光蛋白基因转化. 黄东杰,彭明,李春强. 2014

[10]列当生防菌Br-2的DsRed红色荧光标记及定殖. 王亚娇,纪莉景,栗秋生,王连生,孔令晓. 2017

[11]基因枪法转化小麦幼胚瞬时表达. 吕瑞华,曹团武,陈耀锋,李春莲,任慧莉,郭月霞,曹欣,赵云祥. 2006

[12]不同大豆基因型对大豆遗传转化效率的影响及外源T-DNA插入分析. 杨静,邢国杰,杜茜,隋丽,郭东全,牛陆,杨向东. 2016

[13]小麦幼胚基因枪转化的影响因素研究. 夏晓晖,陈耀锋,李春莲,吕瑞华,曹团武,曹欣,赵云祥. 2006

[14]提高农业科技成果转化效率的对策. 赵康由,宋梅,李颖. 2018

[15]兔生平系统中氮素转化效率的研究. 金岭梅. 1996

[16]农杆菌介导的浸花法转化甘蓝型油菜过程中柱头顶端开裂时期的确定. 王宁宁,王伟杰,王玉康,曹维,李明,Sundus Zafar,胡茂龙,浦惠明,谭小力. 2019

[17]影响根癌农杆菌转化效率的因素综述. 叶文兴,孔令琪. 2019

[18]农业科研成果转化效率提升路径分析. 谢学军,卢淑雯,王丽群,李家磊,王崑仑,崔怡娟,樊晶. 2018

[19]农杆菌介导球孢白僵菌转化体系的建立及突变体筛选. 杨丽荣,全鑫,黄莹,梁慎,薛保国. 2012

[20]nptⅡ::gfp在锦橙遗传转化中转化效率的研究. 何丹丹,邹修平,解栋梁,彭爱红,许兰珍,何永睿,陈善春. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序