抗黄曲霉毒素单链抗体基因的克隆与表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李鑫

作者: 李鑫;李培武;张奇;张文;李园园

作者机构:

关键词: 黄曲霉毒素;抗体可变区;单链抗体

期刊名称: 中国油料作物学报

ISSN: 1007-9084

年卷期: 2012 年 34 卷 05 期

页码: 528-532

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为降低黄曲霉毒素抗体制备成本,在已有的能分泌抗黄曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞系8F6的基础上,成功克隆得到了该单克隆抗体的重链(VH)和轻链可变区(VL)基因片段。通过重叠延伸PCR的方法将轻、重链可变区基因连接,并引入连接肽(Linker)编码序列,构建VH-Linker-VL结构的单链抗体(ScFv)基因,并将该基因克隆到噬菌体表达载体pCANTAB 5E上,使单链抗体以噬菌体展示形式在大肠杆菌TG1中表达。间接竞争ELISA方法检测到该ScFv对黄曲霉毒素B1的抑制率(IC50)值为0.57ng/mL,表明该单链抗体与亲本鼠单抗有相同的抗原结合特异性,且具有很高灵敏度。

分类号: Q78`S188

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